产品介绍Introduction
产品介绍
ExpressCast PAGE彩色凝胶快速试剂盒是种采用上层胶和下层胶的新型预混液,在传统凝胶配方基础上进行了优化,仅加入改进型促凝剂即可制胶,无加TEMED,避免恶臭气味。不仅简化和缩短凝胶配制步骤和时间,而且兼容传统的Laemmli体系中的Tris-Glycine 电泳缓冲液,可以在高电压下快速完成蛋白电泳。上层胶的缓冲液中加入了红色指示剂,使加样孔清晰可见,方便加样。
产品特色
① 仅加入改进型促凝剂即可,无加TEMED,避免恶臭气味
②制备红色的上层胶,胶孔清晰可辨,方便加样
③ 缩短凝胶电泳时间,150V条件下,40-60分钟即可完成电泳
④ 兼容传统的Tris-Glycine电泳缓冲液, 稳定性好,分辨率高,条带更加清晰
操作步骤
()下层胶配制:以10%分离胶,制胶厚度1.0mm为例
1. 分别量取等体积的下层胶溶液2.5ml和下层胶缓冲液2.5ml,轻柔混。
2. 加入50ul改进型促凝剂至上述混合液中,混。
3. 将配制好的溶液,灌入制胶板内, 加入适量的醇或水,压平分离胶,待下层胶凝固后(5-15分钟),弃去上层水或醇,用滤纸吸取多余的水或醇。
(二)上层胶配制
1. 分别量取等体积的上层胶溶液0.75ml和彩色上层胶缓冲液0.75ml,轻柔混。
注意:由于红色颜料的理化性质,使用前请摇。
2. 加入15ul改进型促凝剂至上述混合液中,混。
3. 将配制好的溶液, 灌入制胶板内,缓慢插入梳子。
4. 待上层胶凝固后(10-15分钟),取出梳子,上样, 在Tris-Glycine电泳缓冲液体系中, 电压150V, 电泳40-60分钟。
注意事项:
1. 丙烯酰胺有神经毒性,请穿戴实验服及口罩经行相关的实验,若是不小心溅到身体上,请及时用流水清洗,若有要,请前往医院咨询医生处理。
2. 本品因加入红色颜料,上层胶对样品没有浓缩效果,经过内部成分的优化,与传统凝胶相比,对蛋白条带分离效果更好,分辨率更高,蛋白条带更窄更锐利。
3. 改进型促凝剂的用量仅供参考,量越多的促凝剂可加速凝胶,反之亦然;凝胶速度与温度成显著正相关,温度越高凝胶速度越快,温度越低凝胶速度越慢,实际用量可根据个人实验习惯经验及环境适当调整。
4. 本产品已加入适量的TEMED替代品,如要进步提高凝胶速度,灌胶前溶液中可按补充适量TEMED。
5. 为避免凝胶中气泡的形成,建议在配胶之前,使胶溶液及缓冲液平衡到室温(如室温放置几分钟)。
6. 本产品仅用于科学研究。