【保存条件】
室温保存,有效期1年
【概述】
SuperBlot免冰浴快速转膜液是种改良的Towbin经典缓冲液,这种专有的配方大大提高了转移速度,而不会产生过多的热量而影响蛋白质。SuperBlot免冰浴快速转膜液般不要额外添加甲醇/乙醇或SDS,但它与这些添加剂兼容(可添加甲醇/乙醇0-20%),当分子量大于130KD时建议添加10-20%甲醇或乙醇。
【操作方法】
1. 使用前用去离子水将20×SuperBlot免冰浴快速转膜液释至1×工作液,例如将50ml 20×SuperBlot免冰浴快速转膜液加入950ml去离子水中混。(如分子量大于130KD,可以添加100ml-200ml乙醇,如取100ml 10×SuperBlot蛋白电泳快速转膜液加入700ml-800ml去离子水与100ml-200ml 乙醇混备用)
2. 做好转印三明治结构,然后转移至电泳槽中,设定恒流 400 mA,大约时间15-30分钟完成蛋白转膜。
胶浓度 |
6% |
8% |
10% |
12% |
推荐转膜时长 |
15分钟 |
20分钟 |
30分钟 |
35分钟 |
【注意事项】
1. PVDF膜提前使用甲醇浸泡30秒以上。
2. 转印电流建议设定恒流400mA, 般25-30分钟可以将150kD以下蛋白完全转印;小于100kD蛋白20分钟即可完全转印;对于大于150kD蛋白,建议延长5-10分钟。
3. 凝胶的浓度影响转印的效率,对于胶浓度8%,20分钟即可完成转印;对于胶浓度10%,25-30分钟即可完成转印;对于胶浓度大于 10%,建议延长5-10分钟
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴次性手套操作。
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